DAPI と Hoechst 33258 の違いは何ですか?

DAPI と Hoechst 33258 の違い

DAPI (4',6-ジアミジノ-2-フェニルインドール) とHoechst 33258 はどちらも蛍光染色剤で、細胞核内の DNA を染色するために蛍光顕微鏡で広く使用されています。用途は共通していますが、化学的特性と用途はそれぞれ異なります。

化学構造

DAPI はDNA 内の AT に富む領域に対して高い親和性を持ちますが、 Hoechst 33258 はDNA のマイナー グルーブに優先的に結合し、AT に富む領域をわずかに優先します。

励起と放出

• DAPI は358 nm で励起され、461 nm で発光し、青色の蛍光を生成します。
• Hoechst 33258 は350 nm で励起され、461 nm で発光し、やはり青色の蛍光を発します。ただし、スペクトル特性は濃度と環境によって若干変化することがあります。

透過性

DAPI は一般に、 Hoechst 33258と比較して生細胞への浸透性が低いと考えられており、そのため Hoechst 染色は生細胞イメージングに適しています。

毒性

DAPI と Hoechst 33258 はどちらも潜在的な変異原であり、DNA に挿入される可能性があります。ただし、 Hoechst 33258 はDAPIよりも毒性が低いと考えられており、生細胞アプリケーションで使用できます。

アプリケーション

DAPI はDNA に対する親和性が強く、生細胞膜に対する透過性が比較的低いため、固定細胞や透過処理細胞で広く使用されています。生細胞膜を透過する能力を持つHoechst 33258 は、生細胞イメージングに適しています。

結論

DAPI と Hoechst 33258 はどちらも細胞生物学における DNA 染色の貴重なツールですが、化学構造、透過性、毒性が異なるため、それぞれ異なる用途に適しています。DAPI と Hoechst 33258 のどちらを選択するかは、画像化される細胞が生細胞か固定細胞かなど、実験の具体的な要件によって異なります。