FAM(カルボキシフルオレセイン)

FAM (カルボキシフルオレセイン) は、次のようなさまざまな生化学および生物物理学的アプリケーションで一般的に使用されている緑色蛍光染料です。

    • フローサイトメトリー:細胞集団分析のためにタンパク質または抗体を標識します。
    • 定量PCR(qPCR): DNA増幅検出用のプローブ分子のレポーター染料として。
    • 細胞周期分析:新しく合成された DNA にラベルを付けて細胞の増殖を追跡します。
    • 顕微鏡検査:特定の分子または細胞構造を視覚化します。

主な特徴と対応するフィルター情報の詳細は次のとおりです。

FAM染料:

    • タイプ:フルオレセイン系緑色蛍光染料。
    • 励起/発光波長:
        • 励起ピーク:約493 nm (青色光)
        • 発光ピーク:約517 nm (緑色光)

FAM の主な利点:

    • 高輝度:強い蛍光強度を提供し、高感度検出を実現します。
    • 優れた光安定性:光にさらされても色褪せしません。
    • 広く入手可能:さまざまな標識試薬と複合体が存在します。
    • 複数の検出方法に対応:フローサイトメトリー、顕微鏡、プレートリーダーで動作します。

FAM の主な欠点:

    • 光退色の影響を受けやすい:持続的に光にさらされると色褪せします。
    • 背景蛍光:一部の生物学的サンプルには、干渉する可能性のある天然の緑色蛍光があります。

FAM フィルター:

    • 目的: CY5 フィルターと同様に、 FAM フィルターは FAM の励起および発光範囲内の光を選択的に透過し、他の波長を遮断して信号対雑音比を向上させます。

特定のフィルター プロファイル:

励起フィルター:

    • 帯域幅:より高い特異性 (潜在的に信号が低い) を得るために狭い帯域幅を選択するか、より高い信号 (潜在的に選択性が低い) を得るために広い帯域幅を選択します。アプリケーションのニーズを考慮してください。
    • 例:
        • 狭角: Chroma Technology ET470/22m (440-495 nm)、 Semrock FF01-490/24 (460-510 nm)
        • より広い範囲:オメガ フィルター XF460-40 (430-500 nm)、クロマ テクノロジー ET455/50m (430-520 nm)

排出フィルター:

    • 帯域幅:励起フィルターと同じ考慮事項。
    • 例:
        • 狭角: Chroma Technology ET530/30m (500-560 nm)、 Semrock FF02-525/32 (500-555 nm)
        • より広い範囲:オメガ フィルター XF520-50 (500-570 nm)、クロマ テクノロジー ET515/50m (490-560 nm)

ダイクロイックフィルター:

    • 励起フィルタリングと発光フィルタリングを 1 つのコンポーネントに組み合わせます。異なる染料を使用したマルチカラー イメージングに役立ちます。
    • 例:
        • オメガフィルター デュアルバンドダイクロイックフィルター (励起: 460/490 nm、発光: 520/540 nm)
        • Semrock Cy5/FAM 二色性ビームスプリッター (励起: 470/490 nm、発光: 500/540 nm)

覚えて:

    • 最適な結果を得るために、特定のアプリケーションと機器に基づいてこれらの例を調整してください。
    • フィルターを選択するときは、機器の互換性、必要な選択性、予算などの要素を考慮してください。
  • 詳細な仕様とアプリケーションのサポートについては、フィルターの製造元にお問い合わせください。
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