FAM(カルボキシフルオレセイン)
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FAM (カルボキシフルオレセイン) は、次のようなさまざまな生化学および生物物理学的アプリケーションで一般的に使用されている緑色蛍光染料です。
- フローサイトメトリー:細胞集団分析のためにタンパク質または抗体を標識します。
- 定量PCR(qPCR): DNA増幅検出用のプローブ分子のレポーター染料として。
- 細胞周期分析:新しく合成された DNA にラベルを付けて細胞の増殖を追跡します。
- 顕微鏡検査:特定の分子または細胞構造を視覚化します。
主な特徴と対応するフィルター情報の詳細は次のとおりです。
FAM染料:
- タイプ:フルオレセイン系緑色蛍光染料。
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励起/発光波長:
- 励起ピーク:約493 nm (青色光)
- 発光ピーク:約517 nm (緑色光)
FAM の主な利点:
- 高輝度:強い蛍光強度を提供し、高感度検出を実現します。
- 優れた光安定性:光にさらされても色褪せしません。
- 広く入手可能:さまざまな標識試薬と複合体が存在します。
- 複数の検出方法に対応:フローサイトメトリー、顕微鏡、プレートリーダーで動作します。
FAM の主な欠点:
- 光退色の影響を受けやすい:持続的に光にさらされると色褪せします。
- 背景蛍光:一部の生物学的サンプルには、干渉する可能性のある天然の緑色蛍光があります。
FAM フィルター:
- 目的: CY5 フィルターと同様に、 FAM フィルターは FAM の励起および発光範囲内の光を選択的に透過し、他の波長を遮断して信号対雑音比を向上させます。
特定のフィルター プロファイル:
励起フィルター:
- 帯域幅:より高い特異性 (潜在的に信号が低い) を得るために狭い帯域幅を選択するか、より高い信号 (潜在的に選択性が低い) を得るために広い帯域幅を選択します。アプリケーションのニーズを考慮してください。
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例:
- 狭角: Chroma Technology ET470/22m (440-495 nm)、 Semrock FF01-490/24 (460-510 nm)
- より広い範囲:オメガ フィルター XF460-40 (430-500 nm)、クロマ テクノロジー ET455/50m (430-520 nm)
排出フィルター:
- 帯域幅:励起フィルターと同じ考慮事項。
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例:
- 狭角: Chroma Technology ET530/30m (500-560 nm)、 Semrock FF02-525/32 (500-555 nm)
- より広い範囲:オメガ フィルター XF520-50 (500-570 nm)、クロマ テクノロジー ET515/50m (490-560 nm)
ダイクロイックフィルター:
- 励起フィルタリングと発光フィルタリングを 1 つのコンポーネントに組み合わせます。異なる染料を使用したマルチカラー イメージングに役立ちます。
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例:
- オメガフィルター デュアルバンドダイクロイックフィルター (励起: 460/490 nm、発光: 520/540 nm)
- Semrock Cy5/FAM 二色性ビームスプリッター (励起: 470/490 nm、発光: 500/540 nm)
覚えて:
- 最適な結果を得るために、特定のアプリケーションと機器に基づいてこれらの例を調整してください。
- フィルターを選択するときは、機器の互換性、必要な選択性、予算などの要素を考慮してください。
- 詳細な仕様とアプリケーションのサポートについては、フィルターの製造元にお問い合わせください。