フローサイトメトリーにおけるストークスシフトとは何ですか?

フローサイトメトリーにおけるストークスシフト

ストークス シフトとは、フローサイトメトリーで使用される蛍光体のピーク励起とピーク発光の波長差を指します。蛍光体とは、光励起により光を再放射できる分子です。励起は、特定の波長の光子が蛍光体に吸収され、蛍光体がより高いエネルギー状態に上昇したときに発生します。蛍光体が基底状態に戻ると、光子を放射します。これが放射プロセスです。

フローサイトメトリーにおけるストークスシフトの重要性は多岐にわたります。

• これにより、励起光と放出された蛍光を分離することができ、蛍光信号のより正確で高感度な測定が可能になります。
• これにより、それぞれ異なるストークスシフトを持つ複数の蛍光体を同時に使用して、単一細胞の複数のパラメータを評価できる多重化が可能になります。

ストークス シフトは、吸収ピークと発光ピークの波長差 (通常はナノメートル単位で測定) によって定量化されます。ストークス シフトが大きいほど、1 つの蛍光体の発光スペクトルと別の蛍光体の励起スペクトルの重なりが最小限に抑えられ、スペクトルのスピルオーバーが減少するため、一般的に有益です。

フローサイトメトリーでは、レーザーが励起源として使用され、検出器には発光波長を分離するためのフィルターが装備されています。ストークスシフトは蛍光スペクトルグラフで簡単に視覚化でき、励起ピークと発光ピークの分離が明確に示されます。

フローサイトメーターは、ストークスシフトによってもたらされる独自のスペクトル特性により、各蛍光体の発光を区別できます。蛍光体パネルを最適化するには、ストークスシフトを考慮して重複を最小限に抑え、検出能力を最大化する必要があります。

フローサイトメトリーで使用される一般的な蛍光体のストークスシフトの例