DNA と RNA にはどのような染色が使用されますか?
共有
DNAとRNAの染色
DNA および RNA の染色剤は、生物学的サンプル内の核酸を視覚化するために使用される化合物です。これらの染色剤は、DNA または RNA に特異的に結合するか、または両方と相互作用しますが、親和性は異なります。これにより、科学者は顕微鏡下または電気泳動後のゲル内でこれら 2 種類の核酸を区別することができます。
よく使われる汚れ
- アクリジンオレンジ: DNA に挿入され RNA に結合する細胞透過性の蛍光染料で、DNA に結合すると緑色の蛍光を発し、RNA に結合すると赤色の蛍光を発して区別を可能にします。
- エチジウムブロマイド: DNA の塩基間に挿入される広く使用されている蛍光タグ。主に電気泳動後のゲル内の DNA を視覚化するために使用されます。
- DAPI (4',6-ジアミジノ-2-フェニルインドール) : DNA の AT が豊富な領域に強力に結合する蛍光染色剤。蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーでよく使用されます。
- ヨウ化プロピジウム: 死んだ細胞を透過して DNA に結合する蛍光染料。フローサイトメトリーで細胞生存率を評価するためによく使用されます。
RNA特異的染色
- SYBR Green II : RNA に優先的に結合し、核酸ゲル電気泳動を含むさまざまな用途に使用されます。
- ピロニン Y : RNA に選択的に結合し、DNA に結合するメチルグリーンまたはメチルバイオレットと組み合わせて使用されることが多いです。
染色技術
染色技術は、サンプルと研究の状況によって異なります。蛍光顕微鏡では、細胞内の核酸を視覚化するために、結合の特異性と信号対雑音比が重要です。ゲル電気泳動では、染色剤はゲルマトリックス内の核酸の移動性に影響を与えずに核酸に挿入または結合する必要があります。
安全性と取り扱い
エチジウムブロマイドなどの特定の DNA および RNA 染色剤は、変異原性があり、発がん性がある可能性があると考えられています。これらの化学物質を取り扱う際は、手袋や安全メガネの使用など、適切な安全プロトコルに従う必要があります。環境汚染を最小限に抑えるために、適切な廃棄方法を採用する必要があります。
高度な染色オプション
近年、DNA または RNA 配列に固有のプローブを使用する蛍光 in situ ハイブリダイゼーション (FISH) などの高度な技術が開発されました。これらのプローブは蛍光分子で標識されており、細胞または組織サンプル内の遺伝子または転写産物を非常に特異的に視覚化できます。
結論
DNA および RNA 染色剤にはそれぞれ固有の特性、用途、および制限があります。染色剤の選択は、感度、特異性、実施する分析の種類などの要因によって異なります。これらの化学物質を扱う際は、安全性と適切な取り扱いが最も重要です。