我可以用一个光源同时激发多种荧光团吗?

|K WONG

是的,仅使用一个光源同时激发多个荧光团是完全有可能的。这是生物学和化学中一种非常常用的技术,用于一次性观察细胞或样本的不同部分。实现这一目标依赖于选择合适的灯光类型并使用合适的硬件来控制它。

什么是荧光团?

将荧光团想象成一个能改变光颜色的微小反射器。当您用特定颜色的光照射它时(激发光),荧光团会吸收能量并发光,发出不同颜色的光(发射光)。例如,一个荧光团可能会吸收蓝光并发出绿光。

一个光源如何激发多个目标

单个光源可以通过两种主要方式同时“唤醒”多个不同的荧光团:

  • 宽谱光的强大作用:一些光源,如特殊的白光LED或卤素灯,会产生宽广的“宽带”光谱。这意味着它们同时发出蓝光、绿光、红光和黄光。由于所有颜色都存在于同一束光中,您可以同时激发吸收蓝光的荧光团和吸收红光的荧光团。

  • 共享激发范围:有时,不同的荧光团对光的“偏好”会有重叠。您可能有两种不同的荧光团,它们都能被相同色调的蓝光激发,但一个发出绿光,另一个发出红光。单个蓝色激光或窄光束可以同时激发它们。

秘密硬件:光学组件

如果您用白光照射样品以激发多个荧光团,如何在不被耀眼的白光晃花眼睛的情况下清晰地观察结果?这就是光学组件成为系统中最重要的部分的原因。

为了理解这些光线,需要使用专门的光学滤光片来“引导”光线:

  • 激发滤光片:它们位于光源的前面。如果您的光源是宽光谱的,这个滤光片就像一个“门卫”,只允许激发特定荧光团所需的确切颜色光通过,到达样品,同时阻挡其余的光。
  • 二向色镜这些是倾斜放置的高度专业化的玻璃片。它们被设计成将激发光反射到样品上,但让荧光团发出的荧光通过,直接到达您的眼睛或相机。
  • 发射滤光片:它们放置在相机或目镜之前。它们阻挡来自光源的任何杂散光,只让荧光团的特定发光颜色(发射光)通过。这确保您获得具有明亮发光目标的清晰、黑暗背景。

一个常见挑战:“串扰”或“渗漏”

当同时激发多个荧光团时,您必须小心“串扰”。当荧光团A发出的光意外地穿过为荧光团B设计的滤光片时,就会发生这种情况。这使得荧光团B看起来存在,即使它不存在。为了解决这个问题,您必须选择发射颜色差异很大的荧光团,并使用高度精确的光学发射滤光片来完美分离信号。

总结

您可以使用一个光源激发多个荧光团,通常通过使用宽光谱光或寻找共享激发颜色的荧光团。然而,这个过程中真正的“英雄”是光学滤光片和反射镜的排列,它们精心地分类光线,确保您能清晰准确地看到不同的发光颜色。

 

0 条评论

发表评论

请注意,评论必须在发布之前获得批准。