荧光团中不同光源的比较
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光学滤光片必须经过精确设计，以匹配荧光显微镜中所用光源的特定光谱输出。滤光片的要求会因照明光源的不同而发生显著变化。
| 光源 | 输出频谱特性 | 滤波器设计启示 | 优势 | 缺点 |
|---|---|---|---|---|
| 水银弧光灯（HBO） | 非连续光谱集中在窄谱线（宽度约10纳米）上。在紫外和可见光范围内具有高亮度（亮度/辐射度）。 | 激发滤光片必须能够透射一种或多种特定的汞谱线。虽然可以使用宽带滤光片，但可能会增加自发荧光噪声。 | 最常见的历史资料来源；高亮度/明度。 | 非连续输出。额定寿命短（约200小时）。 |
| 氙弧灯（XBO） | 在可见光范围内光谱相对连续。在近红外（NIR）波段输出功率更高。 | 激发滤光片需要对近红外波段（>800 nm）具有优异的阻挡性能。滤光片必须能够承受更高的热负荷。 | 由于其光谱连续，因此是定量分析的首选方法。 | 亮度不如同等功率的汞灯。较大的电弧尺寸限制了光线的聚焦范围。额定寿命较短（约400小时）。 |
| 金属卤化物弧光灯 | 光谱大致与汞弧灯相似，但各发射谱线之间的相对强度更高。红外波段输出功率高。 | 需要处理高红外输出。 | 使用寿命长（长达2000小时）。由于内置椭圆反射器，对准简便稳定。 | 由于弧光尺寸较大（~1.2 毫米），平均亮度与氙弧灯相似。 |
| 发光二极管（LED） | 发射光的光谱带宽相对较窄（半峰全宽 10 至 40 nm）。可用光谱波段数量有限。不同批次间的峰值波长存在差异（高达 20 nm）。 | 简化的激励滤波器设计；窄光谱带无需扩展的阻挡范围。 | 使用寿命长（超过10000小时）。输出功率可快速控制（毫秒级）。在其窄频带范围内，亮度几乎与弧光灯相当。 | 可用光谱波段有限（缺乏强绿色光源）。批次差异大，输出对温度/电流敏感（最大偏移量达 5 nm）。 |
| 激光器（固态/DPSS） | 在狭窄（单色）光谱范围内具有极高的亮度。通常具有偏振特性。 | 激发滤光片必须阻挡整个输出光谱（例如，DPSS激光器1064 nm的近红外输出）。滤光片应主要通过反射来衰减光，以降低热负荷。分束器的设计必须考虑偏振条件。 | 由于亮度高，在共聚焦显微镜中应用广泛。 | 对所有滤光片组件（TWD、楔形片）的光学质量要求更高。激发滤光片必须具有高反射率。 |
