Was bedeutet das Wort Epifluoreszenz?

Epifluoreszenz - Ein Überblick

Epifluoreszenz bezeichnet eine Methode der Fluoreszenzmikroskopie, bei der das Anregungslicht von oben auf die Probe gerichtet wird und nicht durch die Probe hindurch (wie bei der herkömmlichen Fluoreszenzmikroskopie). Diese Technik ermöglicht die Beleuchtung der Probe mit Licht einer bestimmten Wellenlänge, wodurch die Fluorophore in der Probe Licht mit einer längeren Wellenlänge aussenden. Es handelt sich um eine weit verbreitete Methode zur Beobachtung von Proben, die entweder von Natur aus fluoreszieren oder mit fluoreszierenden Markern versehen sind.

Hauptvorteile der Epifluoreszenz

• Hohe Spezifität bei der Markierung bestimmter Bestandteile einer Probe durch die Verwendung fluoreszierender Markierungen.
• Möglichkeit, lebende Zellen und biologische Prozesse in Echtzeit zu beobachten.
• Verbessertes Signal-Rausch-Verhältnis, da nur die Fluoreszenz der Probe erkannt wird, was die Bildschärfe verbessert.

Anwendungen der Epifluoreszenz

• Zell- und molekularbiologische Forschung.
• Medizinische Diagnostik, einschließlich der Identifizierung von Erregern.
• Umweltüberwachung.
• Werkstoffkunde.

So funktioniert die Epifluoreszenzmikroskopie

Bei der Epifluoreszenzmikroskopie wird eine spezielle Lichtquelle verwendet, um die Probe mit Licht einer bestimmten Wellenlänge zu beleuchten. Dieses Anregungslicht wird gefiltert und durch eine Objektivlinse auf die Probe gerichtet. Die fluoreszierenden Moleküle der Probe absorbieren dieses Licht und geben es bei einer längeren Wellenlänge ab. Ein Emissionsfilter isoliert dann die emittierte Fluoreszenz vom Anregungslicht und das resultierende Bild wird aufgenommen. Diese Methode ermöglicht detaillierte Visualisierungen von Strukturen und Prozessen in Zellen und Geweben.

Bilderfassung in der Epifluoreszenzmikroskopie

Bei der Bildaufnahme in der Epifluoreszenzmikroskopie wird üblicherweise eine Kamera am Mikroskop angebracht, die die Fluoreszenzbilder aufnimmt. Diese Bilder können dann mithilfe einer Bildanalysesoftware analysiert und quantifiziert werden und bieten so Einblicke in die untersuchte biologische oder materielle Probe.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die Epifluoreszenzmikroskopie ein leistungsstarkes und vielseitiges Werkzeug in der wissenschaftlichen Forschung ist, das eine nicht-invasive Möglichkeit bietet, Proben mit hoher Spezifität und Empfindlichkeit zu beobachten und zu analysieren. Ihre Anwendungsmöglichkeiten erstrecken sich über verschiedene Bereiche und machen sie in der modernen wissenschaftlichen Forschung unverzichtbar.