Wie hoch ist die Konzentration von Ethidium-Homodimer-1?

Konzentration von Ethidium Homodimer-1

Ethidium Homodimer-1 (EthD-1) ist ein Fluoreszenzfarbstoff, der in der Molekularbiologie häufig zum Nachweis von Nukleinsäuren in verschiedenen Anwendungen verwendet wird, darunter Fluoreszenzmikroskopie und Durchflusszytometrie. Die in Experimenten verwendete Konzentration von EthD-1 kann je nach spezifischer Anwendung und erforderlicher Empfindlichkeit variieren.

Zum Färben von DNA in Agarosegelen liegt ein typischer Konzentrationsbereich zwischen 1 und 5 µM . In Zelllebensfähigkeitstests, bei denen EthD-1 zur Identifizierung toter Zellen verwendet wird, indem es beschädigte Zellmembranen durchdringt und an DNA bindet, werden üblicherweise Konzentrationen im Bereich von 1 bis 4 µM verwendet. Es ist entscheidend, die Konzentration für jede spezifische Anwendung zu optimieren, um genaue Ergebnisse ohne übermäßige Hintergrundfluoreszenz zu gewährleisten.

Aufgrund seiner hohen Affinität zur DNA ist EthD-1 in niedrigen Konzentrationen sehr wirksam. Es ist jedoch wichtig, vorsichtig damit umzugehen, da es ein starkes Mutagen ist und sich in die DNA einlagern und möglicherweise Mutationen verursachen kann.

Vorbereitung und Verwendung

Zur Herstellung einer Stammlösung wird EthD-1 üblicherweise in Wasser oder einem geeigneten Puffer auf eine Konzentration von 1 mM gelöst. Diese Stammlösung kann dann auf die gewünschte Arbeitskonzentration für das Experiment verdünnt werden. Es ist wichtig, die Lösung vor Licht zu schützen, um ein Ausbleichen des Farbstoffs zu verhindern.

Tragen Sie beim Arbeiten mit EthD-1 immer geeignete Schutzausrüstung, einschließlich Handschuhen und Schutzbrille, um eine Exposition zu vermeiden.