Welche Filtertypen werden in Fluoreszenzmikroskopen verwendet?

In Fluoreszenzmikroskopen verwendete Filtertypen

Fluoreszenzmikroskope sind leistungsstarke Werkzeuge zur Visualisierung von Proben, die bei Beleuchtung mit bestimmten Wellenlängen Licht aussenden. Der Schlüssel zu ihrer Funktionalität liegt in der Verwendung spezieller Filter. Diese Filter sind entscheidend, um das Anregungslicht von der viel schwächeren emittierten Fluoreszenz zu trennen. Hier sind die wichtigsten verwendeten Filtertypen:

1. Anregungsfilter

Diese Filter sind so konzipiert, dass sie nur die Wellenlängen des Lichts durchlassen, die die Fluorophore (fluoreszierende Moleküle) anregen, und alle anderen Wellenlängen blockieren. Dadurch wird sichergestellt, dass die Probe genau mit dem Licht beleuchtet wird, das zur Anregung der Fluoreszenz erforderlich ist.

2. Emissionsfilter

Emissionsfilter blockieren das Anregungslicht und lassen nur die Wellenlängen der emittierten Fluoreszenz passieren. Dies ist entscheidend für die Beobachtung des Fluoreszenzsignals ohne Störungen durch das Anregungslicht.

3. Dichroitische Spiegel (Strahlteiler)

Dichroitische Spiegel sind spezielle Spiegel, die bestimmte Wellenlängen reflektieren und andere durchlassen. In der Fluoreszenzmikroskopie werden sie in einem 45-Grad-Winkel zum Lichtweg positioniert. Sie reflektieren das Anregungslicht zur Probe und lassen die emittierte Fluoreszenz zum Detektionssystem durch.

4. Langpass- und Kurzpassfilter

• Langpassfilter: Diese Filter lassen Wellenlängen über einer bestimmten Grenzwellenlänge passieren und blockieren kürzere Wellenlängen. Sie werden oft in Kombination mit anderen Filtern verwendet, um das Fluoreszenzsignal weiter zu verfeinern.
• Kurzpassfilter: Kurzpassfilter hingegen lassen Wellenlängen unter einem bestimmten Grenzwert passieren und blockieren längere Wellenlängen. Sie können verwendet werden, um den Bereich der erkannten Fluoreszenz einzuschränken.

5. Bandpassfilter

Bandpassfilter lassen nur einen bestimmten Wellenlängenbereich passieren und blockieren sowohl längere als auch kürzere Wellenlängen außerhalb dieses Bereichs. Sie sind sehr effektiv bei der Isolierung bestimmter Fluoreszenzsignale aus einem Bereich emittierter Wellenlängen.

Übersichtstabelle

Jeder dieser Filter trägt entscheidend dazu bei, dass Fluoreszenzmikroskope die mit Fluoreszenzsignalen verbundenen spezifischen Wellenlängen des Lichts wirksam trennen und erkennen können, wodurch eine detaillierte und kontrastreiche Abbildung der Proben ermöglicht wird.