落射蛍光顕微鏡とは何ですか?

落射蛍光顕微鏡

落射蛍光顕微鏡の原理

落射蛍光顕微鏡法では、通常、高輝度ランプまたはレーザーを使用して、特定の波長の光でサンプルを照射します。光はサンプル内の蛍光分子 (蛍光体) を励起し、励起光よりも長い波長の光を放出します。この放出された光が集められ、標本の画像が形成されます。

落射蛍光顕微鏡の主要コンポーネント

• 励起フィルター:蛍光体を励起する光の波長を選択します。
• ダイクロイックミラー（ビームスプリッター）：励起光をサンプルに向けて反射し、放出された蛍光を通過させます。
• 発光フィルター:励起光を除去し、サンプルから放出された蛍光のみが検出器に到達できるようにします。
• 対物レンズ:放出された蛍光を収集し、励起光をサンプルに焦点を合わせる役割も果たします。

落射蛍光顕微鏡の利点

• 蛍光マーカーの使用により、サンプル内のターゲット構造に対する高い特異性が得られます。
• 生きた細胞と動的なプロセスをリアルタイムで観察する機能。
• 異なる励起スペクトルと発光スペクトルを持つ異なる蛍光体を使用することで多重化を実行する可能性。

落射蛍光顕微鏡の限界

• 光退色。励起光に長時間さらされると蛍光体が蛍光を発する能力を失います。
• 光毒性があり、観察中に生細胞に損傷を与える可能性があります。
• 背景蛍光とサンプルからの自己蛍光により、画像のコントラストと鮮明さが低下する可能性があります。

落射蛍光顕微鏡の応用

• 細胞生物学: 細胞の構造、機能、および動態を研究します。
• 微生物学: 微生物を識別し、観察します。
• 病理学的診断: 病変組織を特定するための医学研究。
• 生化学アッセイ: 特定の分子の存在を監視および定量化します。

要約すると、落射蛍光顕微鏡は生物学および医学において重要なツールとして機能し、標本の蛍光標識成分に関する詳細な情報を提供します。一定の制限はあるものの、特異性と生細胞イメージングの利点により、研究には欠かせない技術となっています。