蛍光色素顕微鏡で使用される光源とは?

|Team Syronoptics
蛍光顕微鏡で使用する光源は、特定の励起波長において高強度の光を照射し、試料中の蛍光体を蛍光発光させるように設計されています。

アークランプ

これらは、UV、可視、場合によっては近赤外のスペクトル域にわたって光を放出する広帯域光源です。これらのランプでは、特定の蛍光色素を励起するために必要な狭い波長帯域を選択するためにフィルターが使用されます。
  • 水銀アークランプ(HBO): 特に近紫外、紫、青、緑の領域に特徴的な強いスペクトルピークを持つ高強度光を生成します。非常に明るい一方、視野全体の照明が不均一になることがあります。

  • キセノンアークランプ: 水銀ランプよりも、可視域全体で滑らかかつ連続的なスペクトル出力が得られます。均一な強度が重要となる定量測定でよく使用されますが、いくつかの主要な励起ピークでは一般に出力が低くなります。

  • メタルハライドランプ: 水銀ランプに似たスペクトルを持ちますが、経時安定性に優れているため定量イメージングに有利で、寿命も長くなっています。

発光ダイオード(LED)

LEDは、長寿命で発熱が少なく、高速かつ正確に制御(オン/オフ切り替え)できるため、広く使用されています。
  • 個別のLED: 各LEDは通常、比較的狭い波長帯域内の光を放射します。(20-70nm)。ウォームアップ時間やクールダウン時間が不要で、波長をすばやく切り替えることができます。

レーザー

レーザーは高い単色性(非常に狭い波長範囲の光を放射する性質)を備えているため、高解像度の特殊なイメージング技術に適しています。
  • 種類: 一般的なレーザーには、アルゴンイオンレーザー(例:488 nm)、ヘリウムネオンレーザー(例:543 nm、633 nm)、各種半導体レーザー(例:405 nm)があります。
  • 用途: 共焦点顕微鏡、全反射蛍光(TIRF)顕微鏡、超解像顕微鏡(STED、PALMなど)といった高度な技術の主要光源です。

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