Hoechst 33258 は死んだ細胞を染色しますか?

Hoechst 33258染色の理解

Hoechst 33258 は、二本鎖 DNA の副溝に結合する蛍光染料です。細胞生物学では、細胞の核を染色するために広く使用されており、研究者は蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを使用して細胞形態を視覚化し、細胞を数えることができます。この染料は紫外線によって励起され、DNA に結合すると青色の蛍光を発します。

染色特異性

Hoechst 33258 に関するよくある質問の 1 つは、死細胞を染色するかどうかです。答えは微妙です。第一に、 Hoechst 33258 は生細胞と死細胞の両方に浸透性があるため、細胞の生存能力に関係なく細胞の核に入り込み、染色することができます。これは、染料が細胞膜を通過できるため、細胞膜の破壊や透過化プロトコルを必要としないからです。

死細胞の染色

Hoechst 33258 は生細胞と死細胞の両方を染色できますが、生存率に基づいてそれらを具体的に区別するわけではないことに注意することが重要です。したがって、Hoechst 33258 を単独で使用した場合、細胞が生きているか死んでいるかはわかりません。細胞の生存率を評価するために、Hoechst 33258 は、ヨウ化プロピジウム (PI) など、生細胞と死細胞を区別できる他の染料と組み合わせて使用​​されることがよくあります。PI は、死んでいる細胞または死にかけの細胞の特徴である膜が損傷した細胞にのみ浸透します。したがって、Hoechst 33258 と PI を組み合わせると、細胞の生存率に関する情報が得られます。

結論

要約すると、 Hoechst 33258 は、生細胞と死細胞の両方を染色できる多目的核染色剤です。ただし、本質的には、細胞生存率の 2 つの状態を区別するものではありません。包括的な細胞生存率分析を行うには、Hoechst 33258 を、ヨウ化プロピジウムなどの死細胞に選択的な他の染料と組み合わせて使用​​する必要があります。