マイクロプレートリーダーはどのようにして吸光度を測定するのでしょうか?

マイクロプレートリーダーが吸光度を測定する仕組みを理解する

マイクロプレート リーダーは、生物学や化学などさまざまな科学分野で不可欠なツールであり、マイクロプレート ウェル内のサンプルの吸光度を正確に測定します。マイクロプレート リーダーで吸光度を測定する基本原理は、サンプルの分光光度分析です。この詳細な説明では、プロセスに含まれる手順とメカニズムについて説明します。

主要コンポーネントとプロセス

光源:このプロセスは、マイクロプレート リーダー内の光源 (通常はキセノン フラッシュ ランプまたはタングステン ハロゲン ランプ) から始まります。これらの光源は、広範囲の波長スペクトルにわたって光を放射します。

波長の選択:測定の前に、モノクロメータまたはフィルターを使用して目的の波長を選択します。吸光度の読み取り値は、測定対象物質のピーク吸光度に対応するこの特定の波長に固有のものになるため、この選択は非常に重要です。

サンプルの透過:選択された光は、サンプルを含むマイクロプレートのウェルに向けられます。サンプルを通過する光の量 (透過率) は、ウェル内の物質の濃度によって異なります。

検出:サンプルを通過した光は検出器によって捕捉されます。この検出器は透過光の強度を測定します。吸光度 (A) はランベルト・ベールの法則、A = -log10(T) に基づいて計算されます。ここで、T は透過率 (サンプルを通過する光の強度とサンプルに入る前の光の強度の比) です。

分析:最後に、マイクロプレートリーダーのソフトウェアが吸光度値を分析し、研究者は事前に確立された較正曲線に基づいて各サンプル内の分析対象物の濃度を推測できます。

応用

マイクロプレート リーダーは、酵素結合免疫吸着測定法 (ELISA)、タンパク質および核酸の定量、細胞生存率テストなど、さまざまなアッセイで使用される多目的機器です。複数のサンプルの吸光度を同時に迅速かつ正確に測定できるため、研究と診断の両方の場面で非常に役立ちます。