DAPI はどのようにして死細胞を染色するのでしょうか?
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死細胞のDAPI染色を理解する
DAPI (4',6-ジアミジノ-2-フェニルインドール)は、二本鎖 DNAのAT に富む領域に強く結合する蛍光染色剤です。細胞内の核酸、主に DNA を検出するために蛍光顕微鏡で広く使用されています。サンプルに適用すると、DAPI は DNA の二重らせん構造を崩すことなく、AT に富む配列を優先して DNA の塩基間に挿入されます。DNA に結合すると DAPI の蛍光が増強され、蛍光顕微鏡下で細胞の核を視覚化できるようになります。
DAPI 染色は、生細胞と死細胞の両方を識別するのに特に役立ちますが、死細胞をより効率的に染色できることでよく知られています。この特異性は、細胞膜の透過性から生じます。生細胞では、無傷の細胞膜が DAPI の侵入を制限し、細胞の DNA へのアクセスを制限します。しかし、死細胞では、細胞膜が損傷しているため、DAPI はより簡単に浸透して DNA に結合し、より強い蛍光信号が生じます。
したがって、DAPI は生細胞と死細胞の両方を染色できますが、細胞膜の透過性が高く、より多くの DAPI が DNA に入り込んで結合できるため、染色の強度は一般に死細胞の方が高くなります。この特性により、DAPI は生細胞と死細胞を区別し、細胞周期のダイナミクスとアポトーシスを研究するためのさまざまな研究分野で貴重なツールとなっています。
キーポイント:
- DAPI は二本鎖 DNA 内の AT が豊富な領域に結合します。
- DNA に結合すると蛍光を発し、細胞核を可視化することができます。
- DAPI 染色は、細胞膜が損傷しているため、死んだ細胞ではより強くなります。
- 研究において生細胞と死細胞を区別するために使用されます。