Fluo-3 AMはどのように機能しますか?

Fluo-3 AM の理解

Fluo-3 AM は、細胞内カルシウム (Ca ²⁺ ) レベルを測定するために広く使用されている蛍光染料です。細胞生物学および生理学の分野で強力なツールとして機能し、Ca ²⁺によって制御される細胞プロセスに関する洞察を提供します。

化学構造と性質

Fluo-3 AM は Fluo-3 のアセトキシメチルエステル型で、Ca ²⁺に結合すると蛍光を発する化合物です。この特性により、生細胞イメージングに特に役立ちます。AM エステル基は、細胞膜を介した染料の受動拡散を促進します。細胞内に入ると、細胞内エステラーゼが AM エステル基を切断し、細胞内に染料を閉じ込めて Ca ²⁺に結合できるようにします。

作用機序

Fluo-3 は Ca ²⁺に結合すると構造変化を起こし、蛍光強度が大幅に増加します。この変化は Ca ²⁺の濃度に比例するため、細胞内 Ca ²⁺レベルの定量測定が可能になります。この染料は他の二価カチオンよりも Ca ²⁺に対する特異性が高く、Ca ²⁺媒介プロセスを研究するための正確なツールとなります。

アプリケーション

Fluo-3 AM は、次のようなさまざまな用途に使用されます。

• 生理的刺激に対する Ca ²⁺フラックスのモニタリング。
• Ca ²⁺依存性シグナル伝達経路の研究。
• 筋収縮、神経伝達物質の放出、細胞死などの細胞プロセスにおける Ca ²⁺の役割を調査します。

利点と制限

利点:

• 生細胞内の Ca ²⁺動態をリアルタイムでモニタリングできます。
• Ca ²⁺に対する高い特異性と感度。
• 非侵襲性で、さまざまな細胞タイプに使用できます。

制限事項:

• 長時間の照明による光退色。
• 細胞内で区画化が起こる可能性があり、測定精度に影響する可能性があります。
• 定量分析には慎重な校正が必要です。