525nm Bandpassfilter

Kontext: Dieses Patent beschreibt Verfahren zur Isolierung bestimmter Stammzellpopulationen, beispielsweise hämatopoetischer Stammzellen, aus Knochenmark oder Blut mithilfe von Durchflusszytometrie und fluoreszierender Markierung von Zelloberflächenmarkern.

Verwendung des Filters: Das Filter wird vor dem „FL1“-Fotodetektor auf der optischen Bank des Durchflusszytometers platziert.

Funktion: Er dient als spektrales Auswahlfenster, das gezielt Licht im Bereich 515–535nm transmittiert und gleichzeitig das Licht des Anregungslasers (488nm) sowie die Autofluoreszenz anderer Kanäle blockiert.

Ergebnis: Der spezifische grüne Emissionssignalanteil der an die Stammzellen gebundenen FITC-konjugierten Antikörper (z. B. Anti-Sca-1 oder Anti-c-kit) wird isoliert, sodass das Gerät die Zielzellpopulation präzise sortieren und sammeln kann.

Kontext: Dieses Patent umfasst die „Sequencing-by-Synthesis“-Technologie (Grundlage der Illumina-Sequenzierer), bei der DNA sequenziert wird, indem vier unterschiedlich fluoreszenzmarkierte Nukleotide nachgewiesen werden, die in einen wachsenden DNA-Strang eingebaut werden.

Verwendung des Filters: Der Filter wird als einer von vier Emissionsfiltern im Fluoreszenzbildgebungssystem verwendet und ist speziell dem Detektionskanal „Grün“ zugeordnet.

Funktion: Er trennt die Emission des Fluorophors mit der kürzesten Wellenlänge (das bei dieser speziellen Chemie häufig an die Thymin- oder Cytosinbase gebunden ist) von den drei anderen, längerwelligen Farbstoffen (Gelb, Rot, Fernrot) im Gemisch.

Ergebnis: Es gewährleistet ein hohes Signal-Rausch-Verhältnis für den Grünkanal, sodass der Sequenzierer die Base an dieser Position der DNA-Sequenz korrekt bestimmen kann, ohne dass „Übersprechfehler“ durch die anderen Farbstoffe auftreten.

Kontext: Dieses Patent beschreibt ein Gerät des Typs „Dark Reader“ zur Visualisierung von DNA in Elektrophoresegelen. Statt UV-Licht wird sichtbares blaues Anregungslicht verwendet, wodurch Schäden an den DNA-Proben vermieden werden.

Verwendung des Filters: Der Filter wird als Sichtscheibe oder Kameraobjektivfilter zwischen der beleuchteten Probe und dem Beobachter/Detektor positioniert.

Funktion: Er dient als Sperrfilter, der das intensive blaue Anregungslicht (ca. 460–480nm) unterdrückt und zugleich die Transmission am Emissionsmaximum von DNA-Farbstoffen wie SYBR Green I oder GFP (deren Maximum nahe 520-525nm liegt) maximiert.

Ergebnis: Der Benutzer sieht die DNA-Banden hell (grün) vor einem dunklen Hintergrund leuchten. Dies ermöglicht eine kontrastreiche Visualisierung ohne die Sicherheitsrisiken von UV-Strahlung.