Optische Filter müssen präzise auf das spezifische Emissionsspektrum der in der Fluoreszenzmikroskopie verwendeten Lichtquelle abgestimmt sein. Die Anforderungen an die Filter unterscheiden sich je nach Beleuchtungsquelle erheblich. Lichtquelle Eigenschaften des Ausgangsspektrums Auswirkungen auf die Filterauslegung Vorteile Nachteile Quecksilberbogenlampe (HBO) Nicht kontinuierliches Spektrum, das auf schmale Spektrallinien konzentriert ist (~10 nm breit). Hohe Helligkeit (Leuchtdichte/Strahldichte) im UV- und sichtbaren Bereich. Anregungsfilter müssen eine oder mehrere spezifische Quecksilberlinien transmittieren. Breitbandfilter können verwendet werden, bergen jedoch das Risiko eines erhöhten Autofluoreszenzrauschens. Historisch am häufigsten verwendete Quelle; hohe Helligkeit/Leuchtdichte. Nicht kontinuierliche Emission. Kurze Nennlebensdauer...
Mehr lesen …
Die Stokes-Verschiebung ist einfach als die Wellenlängendifferenz zwischen zwei entscheidenden Punkten eines Fluorochroms definiert:
1. Die maximale Anregungsintensität (die Wellenlänge, bei der die Lichtabsorption maximal ist).
2. Die maximale Emissionsintensität (die Wellenlänge, bei der die Fluoreszenzstrahlung ihr Maximum erreicht).
Da bei der Fluoreszenz Licht absorbiert und anschließend Licht mit geringerer Energie emittiert wird, hat das emittierte Licht stets eine längere Wellenlänge als das Anregungslicht.
Mehr lesen …
